2020 Solved Old Paper (BOT - 304D) New OK

Biotechnology Concepts:-

•      The term biotechnology was coined by Hungarian engineer Karl Ereky in 1919.

•      Biotechnology is a new term but this process has been used since ancient times. For example, wine, curd, vinegar, etc. have been produced by fermentation with the help of microorganisms.

•      After the discovery of RE (Restriction Endonuclease) in 1970, new methods of gene technology developed which were extremely beneficial for humans. This brought revolutionary changes in the field of Biotechnology.

•     Definition:- The branch of biology in which beneficial products are made for human beings by the controlled use of biological factors such as microorganisms or the components of cells is called biotechnology.

जैव प्रौद्योगिकी अवधारणाएँ:-

•       जैव प्रौद्योगिकी शब्द का प्रयोग 1919 में हंगेरियन इंजीनियर कार्ल एरेकी ने किया था।

•       जैव प्रौद्योगिकी एक नया शब्द है, लेकिन इस प्रक्रिया का उपयोग प्राचीन काल से होता आ रहा है। उदाहरण के लिए, शराब, दही, सिरका आदि का उत्पादन सूक्ष्मजीवों की सहायता से किण्वन द्वारा किया जाता रहा है।

•       1970 में RE (प्रतिबंध एंडोन्यूक्लीज)  की खोज के बाद , जीन प्रौद्योगिकी की नई विधियाँ विकसित हुईं जो मनुष्यों के लिए अत्यंत लाभकारी थीं। इससे जैव प्रौद्योगिकी के क्षेत्र में क्रांतिकारी परिवर्तन आए।

•      परिभाषा :-  जीव विज्ञान की वह शाखा जिसमें सूक्ष्मजीवों या कोशिकाओं के घटकों जैसे जैविक कारकों के नियंत्रित उपयोग द्वारा मनुष्यों के लिए लाभकारी उत्पाद बनाए जाते हैं, जैव प्रौद्योगिकी कहलाती है।

Binary Vectors (बाइनरी वेक्टर्स):- These are plasmid systems used in plant genetic engineering that function with Agrobacterium tumefaciens to transfer a desired gene into plant cells. They are called binary because the system consists of two separate plasmids.

(ये पादप आनुवंशिक अभियांत्रिकी में प्रयुक्त प्लास्मिड प्रणालियाँ हैं जो वांछित जीन को पादप कोशिकाओं में स्थानांतरित करने के लिए एग्रोबैक्टीरियम ट्यूमेफेशियंस के साथ कार्य करती हैं। इन्हें बाइनरी इसलिए कहा जाता है क्योंकि इस प्रणाली में दो अलग-अलग प्लास्मिड होते हैं।)

> Originally, gene transfer used the large Ti (Tumor-inducing) plasmid of Agrobacterium tumefaciens. But Ti plasmid is very large and difficult to manipulate. So scientists divided it into two parts:

(मूल रूप से, जीन स्थानांतरण में एग्रोबैक्टीरियम ट्यूमेफेशियंस के विशाल Ti (ट्यूमर-प्रेरक) प्लास्मिड का उपयोग किया जाता था। लेकिन Ti प्लास्मिड बहुत बड़ा होता है और इसे नियंत्रित करना कठिन होता है। इसलिए वैज्ञानिकों ने इसे दो भागों में विभाजित किया:)

i. Disarmed Ti Plasmid (Helper Plasmid) [निष्क्रिय Ti प्लास्मिड (सहायक प्लास्मिड)]:-

> Contains vir genes (virulence genes)

[इसमें विषाणु जीन (विषाणुता जीन) होते हैं]

> vir genes help in transfer of T-DNA into plant cells

(विषाणु जीन पादप कोशिकाओं में T-DNA के स्थानांतरण में सहायता करते हैं)

> Does NOT contain tumor-causing genes

(इसमें ट्यूमर उत्पन्न करने वाले जीन नहीं होते हैं)

ii. Binary Vector (Small Plasmid) [बाइनरी वेक्टर (छोटा प्लास्मिड)]:- Contains: (इसमें शामिल हैं:)

> T-DNA region

(T-DNA क्षेत्र)

> Left Border (LB) & Right Border (RB) sequences

[बाएँ बॉर्डर (LB) और दाएँ बॉर्डर (RB) अनुक्रम]

> Gene of interest

(रुचि का जीन)

> Selectable marker gene (e.g., antibiotic resistance)

[चयन योग्य मार्कर जीन (उदाहरण: एंटीबायोटिक प्रतिरोध)]

> Origin of replication

(प्रतिकृति का उद्गम)

Examples (उदाहरण):- pBIN19, pCAMBIA, pGreen

Chimeric DNA (काइमेरिक DNA):- It is a DNA molecule formed by joining DNA fragments from two different sources (organisms) into a single molecule. It is also called Recombinant DNA.

[यह एक ऐसा DNA अणु है जो दो अलग-अलग स्रोतों (जीवों) से प्राप्त DNA खंडों को जोड़कर एक अणु के रूप में बनता है। इसे पुनर्संयोजित DNA भी कहा जाता है।]

> The term comes from Chimera (a mythical organism made of parts from different animals). Similarly, chimeric DNA contains genetic material from different organisms.

[यह शब्द काइमेरा (विभिन्न जंतुओं के अंगों से बना एक पौराणिक जीव) से लिया गया है। इसी प्रकार, काइमेरिक DNA में विभिन्न जीवों से प्राप्त आनुवंशिक सामग्री होती है।]

Example (उदाहरण):- Human insulin gene inserted into a bacterial plasmid → Produces insulin in bacteria like Escherichia coli.

(मानव इंसुलिन जीन को जीवाणु प्लास्मिड में डाला गया → यह E. कोलाई जैसे जीवाणुओं में इंसुलिन का उत्पादन करता है।)

Biotransformation (जैवरूपरूपीकरण):- It is the chemical modification of a compound by living organisms or enzymes. It usually converts a substance into a more useful, less toxic, or more water-soluble form.

(यह किसी यौगिक का जीवित जीवों या एंजाइमों द्वारा किया गया रासायनिक रूपांतरण है। यह आमतौर पर किसी पदार्थ को अधिक उपयोगी, कम विषैले या अधिक जल-घुलनशील रूप में परिवर्तित करता है।)

> In simple words, it is biological change of a chemical compound, it carried out by microorganisms, plants, animals, or enzymes.

(सरल शब्दों में, यह किसी रासायनिक यौगिक का जैविक परिवर्तन है, जो सूक्ष्मजीवों, पौधों, जानवरों या एंजाइमों द्वारा किया जाता है।)

Example (उदाहरण):-

> Conversion of toxic pesticide into less harmful compound by soil bacteria

(मृदा जीवाणुओं द्वारा विषैले कीटनाशक का कम हानिकारक यौगिक में रूपांतरण)

> Drug metabolism in liver (Phase I & Phase II reactions)

[यकृत में औषधि उपापचय (चरण I और चरण II अभिक्रियाएँ)]

Difference Between Plasmid Vector and Phage Vector (प्लास्मिड वेक्टर और फाज वेक्टर में अंतर):- Both plasmid vectors and phage vectors are used in recombinant DNA technology, but they differ in their utility and applications.

(पुनर्योजी DNA तकनीक में प्लास्मिड वेक्टर और फेज वेक्टर दोनों का उपयोग किया जाता है, लेकिन इनकी उपयोगिता और अनुप्रयोग भिन्न-भिन्न होते हैं।)

i. Nature of Vector (वेक्टर की प्रकृति):-

> Plasmid Vector → Small circular double-stranded DNA molecule. Example: pBR322, pUC19

(प्लास्मिड वेक्टर → छोटा वृत्ताकार द्वि-केन्द्रित DNA अणु। उदाहरण: pBR322, pUC19)

> Phage Vector → Derived from bacteriophages (viruses that infect bacteria), commonly from Bacteriophage lambda.

[फेज वेक्टर → बैक्टीरियोफेज (जीवाणुओं को संक्रमित करने वाले वायरस) से व्युत्पन्न, आमतौर पर बैक्टीरियोफेज लैम्डा से।]

ii. Insert Size Capacity (समाकलन क्षमता):- 

Plasmid Vector (प्लास्मिड वेक्टर):-

> Can carry small DNA fragments (≈ 5–10 kb)

[छोटे DNA खंड (लगभग 5-10 kb) ले जा सकता है।]

> Suitable for cloning small genes

(छोटे जीनों की क्लोनिंग के लिए उपयुक्त।)

Phage Vector (फाज वेक्टर):-

> Can carry larger DNA fragments (≈ 15–25 kb in λ phage)

[बड़े DNA खंडों (λ फेज में लगभग 15-25 kb) को ले जा सकता है]

> Useful for genomic library construction

(जीनोमिक लाइब्रेरी निर्माण के लिए उपयोगी)

iii. Mode of Entry into Host (परपोषी में प्रवेश का तरीका):-

> Plasmid → Introduced by transformation

(प्लास्मिड → रूपांतरण द्वारा प्रवेश)

> Phage → Introduced by infection (more efficient DNA delivery)

[फाज → संक्रमण द्वारा प्रवेश (अधिक कुशल DNA वितरण)]

iv. Cloning Efficiency (क्लोनिंग दक्षता):-

> Plasmid → Lower efficiency compared to phage

(प्लास्मिड → फाज की तुलना में कम दक्षता)

> Phage → Higher efficiency due to viral infection mechanism

(फाज → वायरल संक्रमण तंत्र के कारण उच्च दक्षता)

v. Screening Method (स्क्रीनिंग विधि):-

> Plasmid → Antibiotic resistance markers

(प्लास्मिड → एंटीबायोटिक प्रतिरोध मार्कर)

> Phage → Plaque formation on bacterial lawn

(फाज → जीवाणु लॉन पर प्लाक निर्माण)

Restriction Enzyme:- It is a nuclease enzyme that cleaves DNA sequence at a specific recognition sites known as restriction sites. 

Discovery:- In 1970 the first restriction endonuclease enzyme HindII was isolated. For the subsequent discovery and characterization of numerous restriction endonucleases, in 1978 Daniel Nathans, Werner Arber, and Hamilton O. Smith awarded for Nobel Prize for Physiology or Medicine.

Restriction modification system:- In bacteria, modification enzymes methylate the bacterial DNA. Methylation of bacterial DNA at the recognition sequence typically protects the own DNA of the bacteria from being cleaved by restriction enzyme.

Types:- There are two different kinds of restriction enzymes:

(1) Exonucleases:- They catalyses hydrolysis of terminal nucleotides from the end of DNA or RNA molecule either 5’to 3’ direction or 3’ to 5’ direction. Example: exonuclease I, exonuclease II etc.

(2) Endonucleases:- They can recognize specific base sequence (restriction site) within DNA or RNA molecule and cleave internal phosphodiester bonds within a DNA molecule. Example: EcoRI, Hind III, BamHI etc.

प्रतिबंध एंजाइम:-  यह एक न्यूक्लिएज एंजाइम है जो डीएनए अनुक्रम को विशिष्ट पहचान स्थलों पर विभाजित करता है जिन्हें प्रतिबंध स्थल कहा जाता है। 

खोज:-  1970 में पहला रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज़ एंजाइम HindII पृथक किया गया। इसके बाद अनेक रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज़ की खोज और उनके लक्षण वर्णन के लिए, 1978 में डेनियल नैथंस, वर्नर आर्बर और हैमिल्टन ओ. स्मिथ को शरीर क्रिया विज्ञान या चिकित्सा के क्षेत्र में नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया।

प्रतिबंध संशोधन प्रणाली:-  जीवाणुओं में, संशोधन एंजाइम जीवाणु डीएनए का मिथाइलेशन करते हैं। पहचान अनुक्रम पर जीवाणु डीएनए का मिथाइलेशन आमतौर पर जीवाणु के अपने डीएनए को प्रतिबंध एंजाइम द्वारा विखंडित होने से बचाता है।

प्रकार:-  प्रतिबंध एंजाइम दो प्रकार के होते हैं:

(1) एक्सोन्यूक्लिएज़:-  ये डीएनए या आरएनए अणु के अंतिम छोर पर स्थित टर्मिनल न्यूक्लियोटाइड के हाइड्रोलिसिस को उत्प्रेरित करते हैं, चाहे दिशा 5' से 3' की ओर हो या 3' से 5' की ओर। उदाहरण: एक्सोन्यूक्लिएज़ I, एक्सोन्यूक्लिएज़ II आदि।

(2) एंडोन्यूक्लिएज़:-  ये डीएनए या आरएनए अणु के भीतर विशिष्ट बेस अनुक्रम (प्रतिबंध स्थल) को पहचान सकते हैं और डीएनए अणु के भीतर आंतरिक फॉस्फोडिएस्टर बंधों को तोड़ सकते हैं। उदाहरण: इकोआरआई, हिंड III, बैमएचआई आदि।

Agrobacterium tumefaciens:- It causes Crown gall disease in angiosperm plants. Ti-plasmid is found in it.

Mechanism of Gene Transfer:-

•  The T - DNA portion of the Ti - plasmid has the property that it can integrate into the plant's genome.

•  Leaf pieces release the Aceto - Syringine chemical that activates the Vir - Operon of T - DNA.

•  Once activated, the T-DNA portion separates from the plasmid and enters into many plant cells.

•  Now this T-DNA integrates into the genome by going into the nucleus.

•  This results in stable transformation of the plant.

एग्रोबैक्टीरियम ट्यूमेफेशियंस :-  यह एंजियोस्पर्म पौधों में क्राउन गॉल रोग का कारण बनता है। इसमें टीआई-प्लास्मिड पाया जाता है।

जीन स्थानांतरण की प्रक्रिया:-

•   टीआई-प्लास्मिड के टी-डीएनए भाग में यह गुण होता है कि यह पौधे के जीनोम में एकीकृत हो सकता है।

•   पत्ती के टुकड़े एसिटो-सिरिंगिन नामक रसायन छोड़ते हैं जो टी-डीएनए के विर-ऑपेरॉन को सक्रिय करता है।

•   सक्रिय होने के बाद, टी-डीएनए भाग प्लास्मिड से अलग हो जाता है और कई पादप कोशिकाओं में प्रवेश कर जाता है।

•   अब यह टी-डीएनए केंद्रक में जाकर जीनोम में एकीकृत हो जाता है।

•   इसके परिणामस्वरूप पौधे का स्थिर रूपांतरण होता है।

Advantages of Direct Gene Transfer Methods (प्रत्यक्ष जीन स्थानांतरण विधियों के लाभ):- Direct gene transfer methods introduce DNA directly into plant cells without using biological vectors such as Agrobacterium.

(प्रत्यक्ष जीन स्थानांतरण विधियों के माध्यम से एग्रोबैक्टीरियम जैसे जैविक वाहकों का उपयोग किए बिना DNA को सीधे पादप कोशिकाओं में पहुँचाया जाता है।)

i. Not Species-Specific (जाति-विशिष्ट नहीं):-

> Can be used in monocots and dicots

(एकबीजपत्री और द्विबीजपत्री पौधों में प्रयोग किया जा सकता है)

> Very useful for crops less susceptible to Agrobacterium (e.g., cereals)

[एग्रोबैक्टीरियम के प्रति कम संवेदनशील फसलों (जैसे अनाज) के लिए अत्यंत उपयोगी]

ii. No Vector Requirement (वाहक की आवश्यकता नहीं):-

> Does not require bacterial vectors

(जीवाणु वाहकों की आवश्यकता नहीं होती)

> Avoids complications of vir genes and T-DNA borders

(वायरल जीन और T-DNA सीमाओं की जटिलताओं से बचा जा सकता है)

iii. Faster Process (तीव्र प्रक्रिया):-

>  Direct delivery of DNA

(DNA का सीधा वितरण)

> Less time compared to vector-mediated methods

(वाहक-मध्यस्थ विधियों की तुलना में कम समय लगता है)

iv. Transfer of Large DNA Fragments (बड़े DNA खंडों का स्थानांतरण):-

>  Capable of transferring large genes or multiple genes

(बड़े जीन या एकाधिक जीन स्थानांतरित करने में सक्षम)

> Useful for stacking traits

(लक्षणों के संचयन के लिए उपयोगी)

v. Organelle Transformation Possible (ऑर्गेनेल रूपांतरण संभव):-

> Can transfer genes into chloroplasts and mitochondria

(क्लोरोप्लास्ट और माइटोकॉन्ड्रिया में जीन स्थानांतरित कर सकता है)

> Important for plastid transformation

(प्लास्टिड रूपांतरण के लिए महत्वपूर्ण)

vi. Reduced Biological Contamination (जैविक संदूषण में कमी):-

> No bacterial infection involved

(कोई जीवाणु संक्रमण शामिल नहीं)

> Cleaner experimental system

(स्वच्छ प्रायोगिक प्रणाली)

Introduction:-

> The technology of recombinant DNA was developed in 1973 by Boyer and Cohen.

> It is popularly known as genetic engineering. 

> Recombinat DNA:- When foreign gene is inserted into a vector, then it is called as recombinant DNA.

> Objective:- This is the natural mathod of amplification of gene of interest.

Process of Recombinant DNA Technology:- The complete process of recombinant DNA technology includes multiple steps-

Step-1. Isolation of Genetic Material:- The first and the initial step in Recombinant DNA technology is to isolate the desired DNA in its pure form i.e. free from other macromolecules.

Step-2.Cutting the gene at the recognition sites:- The restriction enzymes play a major role in determining the location at which the desired gene is inserted into the vector genome. These reactions are called ‘restriction enzyme digestions’.

Step-3. Ligation of DNA Molecules:- In this step of Ligation, the joining of the two pieces – a cut fragment of DNA and the vector together with the help of the enzyme DNA ligase.

Step-4. Insertion of Recombinant DNA Into Host:- In this step, the recombinant DNA is introduced into a recipient host cell. This process is termed as Transformation. Once the recombinant DNA is inserted into the host cell, it gets multiplied. As a result the inserted gene of interest is also multiplied.

Step-5. Amplifying the gene copies:- It is a process to amplify a single copy of DNA into thousands to millions of copies once the proper gene of interest has been cut using restriction enzymes.

Application of Recombinant DNA Technology:-

> DNA technology is also used to detect the presence of HIV in a person.

> Gene Therapy:- It is used as an attempt to correct the gene defects which give rise to heredity diseases.

> Clinical diagnosis:- ELISA is an example where the application of recombinant

>Recombinant DNA technology is widely used in Agriculture to produce genetically-modified plants such as  Flavr Savr tomatoes, golden rice rich in proteins, and Bt-cotton to protect the plant against ball worms and a lot more.

> In the field of medicines, Recombinant DNA technology is used for the production of Insulin.

परिचय:-

रिकॉम्बिनेंट डीएनए की तकनीक का विकास 1973 में बोयर और कोहेन द्वारा किया गया था।

इसे आमतौर पर जेनेटिक इंजीनियरिंग के नाम से जाना जाता है। 

>  पुनर्संयोजित डीएनए:-  जब किसी वेक्टर में कोई बाहरी जीन डाला जाता है, तो उसे पुनर्संयोजित डीएनए कहा जाता है।

उद्देश्य  :-  यह रुचि के जीन के प्रवर्धन की प्राकृतिक विधि है।

पुनर्संयोजित डीएनए प्रौद्योगिकी की प्रक्रिया:-  पुनर्संयोजित डीएनए प्रौद्योगिकी की संपूर्ण प्रक्रिया में कई चरण शामिल हैं-

चरण-1.  आनुवंशिक सामग्री का पृथक्करण:-  पुनर्संयोजित डीएनए प्रौद्योगिकी में पहला और प्रारंभिक चरण वांछित डीएनए को उसके शुद्ध रूप में पृथक करना है, अर्थात् अन्य वृहद अणुओं से मुक्त।

चरण-2. जीन को पहचान स्थलों पर काटना:-  वांछित जीन को वेक्टर जीनोम में किस स्थान पर डाला जाए, यह निर्धारित करने में प्रतिबंध एंजाइम महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। इन प्रतिक्रियाओं को 'प्रतिबंध एंजाइम पाचन' कहा जाता है।

चरण-3. डीएनए अणुओं का लिगेशन:-  लिगेशन के इस चरण में, डीएनए के कटे हुए खंड और वेक्टर को डीएनए लाइगेज एंजाइम की मदद से एक साथ जोड़ा जाता है।

चरण-4. मेजबान कोशिका में पुनर्योजी डीएनए का सम्मिलन:-  इस चरण में, पुनर्योजी डीएनए को एक प्राप्तकर्ता मेजबान कोशिका में डाला जाता है। इस प्रक्रिया को रूपांतरण कहा जाता है। मेजबान कोशिका में पुनर्योजी डीएनए के प्रवेश करने के बाद, यह गुणन करने लगता है। परिणामस्वरूप, डाले गए लक्षित जीन का भी गुणन होता है।

चरण-5. जीन प्रतियों का प्रवर्धन:-  यह एक ऐसी प्रक्रिया है जिसमें रुचि के उपयुक्त जीन को प्रतिबंध एंजाइमों का उपयोग करके काटने के बाद डीएनए की एक प्रति को हजारों से लाखों प्रतियों में प्रवर्धित किया जाता है।

पुनर्संयोजित डीएनए प्रौद्योगिकी का अनुप्रयोग:- डीएनए तकनीक का उपयोग किसी व्यक्ति में एचआईवी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए भी किया जाता है।

जीन  

थेरेपी:-  इसका उपयोग आनुवंशिक रोगों को जन्म देने वाले जीन दोषों को ठीक करने के प्रयास के रूप में किया जाता है।

नैदानिक  

निदान:-  ELISA एक ऐसा उदाहरण है जहाँ पुनर्संयोजित यौगिकों का अनुप्रयोग होता है।

पुनर्संयोजित डीएनए प्रौद्योगिकी का उपयोग कृषि में आनुवंशिक रूप से संशोधित पौधों जैसे कि फ्लेवर सेवर टमाटर, प्रोटीन से भरपूर गोल्डन राइस और बॉल वर्म से पौधों की रक्षा करने के लिए बीटी-कपास आदि के उत्पादन के लिए व्यापक रूप से किया जाता है।

चिकित्सा क्षेत्र में, इंसुलिन के उत्पादन के लिए रिकॉम्बिनेंट डीएनए तकनीक का उपयोग किया जाता है।

Crown Gall Disease (क्राउन गॉल रोग):-

Causal Organism (रोगजनक):- Crown gall disease is caused by the bacterium Agrobacterium tumefaciens.

(क्राउन गॉल रोग एग्रोबैक्टीरियम ट्यूमेफेशियंस नामक जीवाणु के कारण होता है।)

Affected Plants (प्रभावित पौधे):- Rose, Grapevine, Apple, Peach, Many dicot ornamental and fruit crops.

(गुलाब, अंगूर, सेब, आड़ू, कई द्विबीजपत्री सजावटी और फलदार फसलें।)

Symptoms (लक्षण):-

> Tumor-like galls at crown region (junction of root & stem)

[जड़ और तने के जोड़ (क्राउन क्षेत्र) पर ट्यूमर जैसी गांठें बन जाती हैं।]

> Galls may also form on roots and stems

(जड़ों और तनों पर भी गांठें बन सकती हैं।)

> Young galls are soft and white

(नई गांठें मुलायम और सफेद होती हैं।)

> Older galls become hard, brown, and woody

(पुरानी गांठें सख्त, भूरी और लकड़ी जैसी हो जाती हैं।)

> Stunted growth and reduced yield

(विकास में रुकावट और उपज में कमी।)

Mode of Infection (संक्रमण का तरीका):-

> Bacteria enter through wounds (caused by pruning, insects, or cultivation).

[जीवाणु घावों (छंटाई, कीटों या खेती के कारण) के माध्यम से प्रवेश करते हैं।]

> The bacterium transfers a part of its Ti plasmid (T-DNA) into plant cells.

[जीवाणु अपने Ti प्लास्मिड (T-DNA) का एक हिस्सा पौधे की कोशिकाओं में स्थानांतरित कर देता है।]

> T-DNA integrates into plant genome → uncontrolled cell division → gall formation.

(T-DNA पौधे के जीनोम में एकीकृत हो जाता है → अनियंत्रित कोशिका विभाजन → गांठों का निर्माण।)

Electroporation:- Introduction of DNA into plant cells by making minute pores in the plant cell membrane is called as electroporation.

> This method involves suspension of plant protoplasts in a suitable ionic solution containing linearized recombinant plasmid DNA.

> This mixture is then exposed to low voltage-long pulses or high voltage short pulses for the desired number of cycles.

> The electrical pulses are thought to induce transient pores in the plasma lemma through which the DNA molecules are incorporated.

> Treated protoplasts are then cultured to obtain cell colonies and plants.

इलेक्ट्रोपोरेशन:- पादप कोशिका झिल्ली में सूक्ष्म छिद्र बनाकर पादप कोशिकाओं में डीएनए का प्रवेश कराना इलेक्ट्रोपोरेशनकहलाता है

इस विधि में पादप प्रोटोप्लास्ट को रेखीयकृत युक्त उपयुक्त आयनिक विलयन में निलंबित करना शामिल है। पुनर्संयोजित प्लास्मिड डीएनए।

इसके बाद इस मिश्रण को वांछित संख्या में चक्रों के लिए कम वोल्टेज वाले लंबे पल्स या उच्च वोल्टेज वाले छोटे पल्स के संपर्क में लाया जाता है।

ऐसा माना जाता है कि विद्युत स्पंदन प्लाज्मा लेम्मा में क्षणिक छिद्र उत्पन्न करते हैं, जिनके माध्यम से डीएनए अणु समाहित हो जाते हैं।

उपचारित प्रोटोप्लास्ट को फिर संवर्धित करके कोशिका कॉलोनियां और पौधे प्राप्त किए जाते हैं।